Um ano depois, em 2002, Callahan seria escolhido pelo diretor do Departamento de Estado para o Bureau de Segurança Internacional e Não-Proliferação para servir como “ diretor clínico dos programas Cooperativos de Redução de Ameaças [CTR] ” em seis antigas instalações de Armas Biológicas da União Soviética como parte do o programa Bioindustry Initiative (BII), onde foi oficialmente encarregado de cumprir os objetivos declarados da missão, que envolvia a “reconfiguração de antigas instalações de produção de armas biológicas” na antiga União Soviética e a aceleração da “produção de medicamentos e vacinas” . Mais especificamente, no entanto, Callahan seria encarregado de programas de ganho de função para agentes virais nessas instalações.Em 2005, duas coisas dignas de nota aconteceram.
O PREDICT, um projeto do programa Ameaças Pandêmicas Emergentes (EPT) da USAID, foi iniciado em 2009 para fortalecer a capacidade global de detecção de vírus com potencial pandêmico que podem se mover entre animais e pessoas. A PREDICT fez contribuições significativas para fortalecer as capacidades globais de vigilância e diagnóstico laboratorial para vírus conhecidos e recém-descobertos em vários grupos de vírus importantes, como filovírus (incluindo ebolavírus), vírus influenza, paramixovírus e coronavírus.O objetivo declarado deste programa era conduzir a vigilância de patógenos que poderiam ser um risco de transbordamento zoonótico. Isso parece razoável na superfície. Algumas das piores doenças da história humana começaram na vida selvagem e chegaram às pessoas.
As atividades PREDICT apoiaram a preparação para ameaças pandêmicas emergentes e a Agenda Global de Segurança da Saúde, principalmente na África e na Ásia. Uma década depois, mais de 30 países ao redor do mundo têm sistemas mais fortes para detectar, identificar, prevenir e responder com segurança a ameaças virais. A PREDICT iniciou o One Health Surveillance, uma abordagem colaborativa transdisciplinar para entender o risco de doenças infecciosas na interface animal-humano. A força de trabalho treinada pela PREDICT, incluindo especialistas em doenças zoonóticas e cientistas de laboratório em mais de 60 laboratórios nacionais, universitários e parceiros, é um dos melhores recursos de resposta para ajudar na detecção e resposta seguras e protegidas ao COVID-19 e outras ameaças biológicas emergentes.
Em 2007, Dr. Paul McCray et al da Universidade de Iowa publicaram um estudo no qual introduziram um vetor carregando uma sequência humana codificadora de ACE2 em camundongos do tipo selvagem e, posteriormente, desenvolveram uma cepa de camundongo transgênica hACE2 bem-sucedida. A expressão de ACE2, que é regulada pelo promotor da citoqueratina 18 humana (K18) nas células epiteliais, foi observada nas células epiteliais das vias aéreas inicialmente infectadas. Estudos mostraram que o camundongo transgênico K18-hACE2 infectado com uma cepa humana de SARS-CoV por meio de inoculação intranasal não sobreviveria.Com esses estudos, os cientistas conseguiram determinar que a SARS era capaz de causar reações inflamatórias em modelos murinos, particularmente nos pulmões e no tecido cerebral, pressagiando a pneumonia e as complicações neurológicas do COVID-19.
A infecção começaria no epitélio das vias aéreas, se espalharia para os alvéolos e, finalmente, sairia dos pulmões para o cérebro. A infecção causa infiltração de macrófagos e linfócitos nos pulmões e regulação positiva de citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias nos pulmões e no cérebro. Três a cinco dias após a infecção, os camundongos K18-hACE2 começaram a perder peso e se tornaram letárgicos com a respiração difícil. Todos morreram em sete dias. Essas observações suportam que a expressão transgênica de hACE2 em células epiteliais pode converter a infecção moderada por SARS-CoV em uma doença fatal.
Em 2002, uma equipe de pesquisadores da Universidade Estadual de Nova York liderada por Eckard Wimmer montou um modelo de DNA para o RNA poliovírus usando uma sequência de nucleotídeos disponível na Internet e oligonucleotídeos sintéticos por correspondência. Usando um procedimento laboratorial de rotina, eles então converteram o DNA em RNA e produziram um poliovírus infeccioso e neurovirulento capaz de paralisar e matar camundongos.1 Esse trabalho demonstrou claramente pela primeira vez a viabilidade de sintetizar quimicamente um patógeno conhecendo apenas sua sequência de nucleotídeos. Alguns chamaram o trabalho de “irresponsável”, e houve especulação generalizada na imprensa de que bioterroristas poderiam usar a tecnologia para criar vírus mais virulentos, como a varíola, a partir de sequências genéticas publicadas ou criar novos vírus mais letais. Wimmer respondeu que “um malfeitor não usaria esse método muito tedioso para sintetizar um vírus. Esse terrorista preferiria usar vírus já existentes na natureza”.A tecnologia para fazer isso está se tornando cada vez mais difundida e acessível. É apenas uma questão de tempo até que vários atores violentos não-estatais tenham algumas idéias engraçadas, e algum biohacker em seu meio decida produzir patógenos viáveis sinteticamente em seu porão com algumas dezenas de milhares de dólares em equipamentos improvisados juntos de coisas do eBay.